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      凱氏定氮儀測定醫用膠原蛋白海綿中蛋白質含量

      更新時間:2020-07-06      點擊次數:1351

      前言

      膠原蛋白海綿是以牛跟腱為原材料,通過酶解、純化制取高純Ι型膠原,再根據互貫網絡技術制成。 膠原分子兼有修復、止血和填充三種作用,能夠激活內源性凝血途徑,在使用時通過壓迫創面激活內源性凝血,以達到止血效果。

      實驗部分

       

      1.1實驗原理

            小麥中的有機態氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉化為氨態氮。加堿蒸餾,使氨析出,用硼酸吸收后,再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定。

      1. 2 儀器與設備

      K1160 全自動凱氏定氮儀

      SH 420F 石墨消解儀

       

      1. 3 試劑與耗材

       

      實驗中涉及到的試劑,均為優級純或分析純;實驗用水為無氨蒸餾水。

      1.3.1 鹽酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標準滴定液。

      1. 3 . 2 硼酸溶液:質量分數 2% 。

      1. 3. 3 氫氧化鈉溶液:質量分數 40% 。

      1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲

      酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時混合搖勻備用。

      1. 3 . 5 催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片

      1. 4 實驗過程

      1 . 4 . 1 取樣

      將樣品剪碎后,稱量0.01g 的樣品(至 0 . 1mg ),加硫酸鉀 0.3g 與硫酸銅 0 .02g ,再沿瓶壁滴加硫酸2mL 。

      1 . 4 .2 消解

      利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,設定消解溫度參數如下表:

      消化完畢后,將消化管取下冷卻。

      1 . 4 . 3 上機測試

      待消化管內溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上,開始蒸餾滴定。定氮儀設置程序如下:

       

      式中:M-標準酸摩爾濃度(mol/L)

       W-樣品質量(g)

       V0-樣滴定標準酸消耗量(mL)

       V-樣品滴定標準酸消耗量(mL)

      5.79-樣品蛋白系數

      結果與討論

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